大鼠断肢保存方法与血管组织病理变化的实验研究

目的 观察断肢不同保存方法与断肢血管病理变化的关系。方法 选用成年标准Wistar大鼠45只，随机分为3组，每组15只。I组：干燥实验组；Ⅱ组：75％乙醇实验组；Ⅲ组：生理盐水实验组。每组又根据实验条件的不同分为3个实验小组，每组5只。各组动物根据正交设计安排实验。结论 实验证实了(1)断肢保存的最佳方法是干燥、低温(0-4℃)、12h以内；(2)用生理盐水、0-4℃，36h的条件保存断肢与干燥、低温(0-4℃)、12h的条件能获得同样的保存效果，且不造成断肢血管明显的病理改变；(3)保存温度与断肢血管组织病理改变的相关性最大，高温是造成断肢血管组织病理改变的首要因素。     

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染对肾移植受者存活的影响

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)和(或)丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染对肾移植受者长期存活的影响及预防措施。方法 HBV和(或)HCV感染肾移植受者110例(感染组),其中HBV感染受者56例、HCV感染受者52例,HBV与HCV合并感染2例。非HBV与非HCV感染受者694例(非感染组)。感染组受者术前有病毒复制者予积极治疗,研究早期肝功能正常者可接受肾移植,后期均用聚合酶链反应(PCR)检测,要求连续3～6个月HBV脱氧核糖核酸(DNA)0copy/ml,HCV核糖核酸(RNA)0copy/ml方可接受肾移植。术后定期检测HBV与HCV,定期检测感染组受者HBVDNA滴度、HCVRNA滴度。发现HBV复制,选用拉米夫定、阿德福韦酯治疗,酌情减少免疫抑制剂用量。分别比较两组术后1、3、5年人、肾存活率,比较两组的肝功能衰竭病死率。结果非感染组人、肾存活率分别为:1年94.2%、91.4%,3年为86.4%、85.2%,5年为82.7%、78.9%;感染组人、肾存活率分别为:1年90.2%、88.1%,3年为88.9%、86.2%,5年为81.5%、76.3%;两组数据比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。感染组中14例(12.7%)死于肝功能衰竭,其中10例为HBV感染者,非感染组受者无1例死于肝衰竭。感染组术后肝衰竭病死率明显高于非感染组(12.7%、0,P<0.05)。结论受者术前HBV和(或)HCV感染会明显增加肾移植术后肝衰竭死亡危险。患者术前处于病毒复制期应予积极治疗,在肝炎病毒停止复制6个月后再考虑肾移植。长期随访中应定期复查HBV与HCV感染指标,早确诊、早治疗,并及时调整免疫抑制剂剂量。     

干血斑样本用于人类免疫缺陷病毒1型前病毒基因诊断的研究

目的研究干血斑（DBS）样本用于人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）感染前病毒DNA基因诊断的可行性。方法采集59例静脉吸毒HIV-1感染者和22名HIV-1阴性健康人EDTA抗凝静脉全血5ml，保存全血1ml，另用50μl制备干血斑样本后，分离血浆。QIAamp Blood Mini试剂盒和10％Chelex 100树脂分别提取全血和干血斑中细胞DNA。Roche Cobas Amplicor逆转录聚合酶链反应检测HIV-1感染者血浆病毒载量。HIV-1Env基因Gp41区，gag基因，pol基因分别用2对外侧和内侧引物，按照套式PCR方法，进行扩增。以HIV-1任何两个基因区扩增结果组合判断HIV-1感染。结果在重复2～3次的前提下，59份DBS样本HIV-1感染基因诊断敏感度93％（95％可信区间89％～97％），34份全血样本94％（95％可信区间89％～98％）。疋。检验显示，两种样本用于HIV-1基因诊断时差异无统计学意义。22份两种阴性样本特异性均为100％（95％可信区间95．93％～100％）。8份血浆病毒载量（VL）〉4．0 Log的DBS样本用于基因诊断的可重复性和HIV-1感染样本检出率优于5份VL〈4．0 Log样本。18对全血和DBS样本HIV-1基因诊断一致性分析，符合率94％，一份DBS样本HIV-1特异三个基因片段均未扩增。结论干血斑样本易采集，便于运输，保存条件低，费用低廉，用于HIV-1基因诊断时与全血样本检测结果无显著性差异，病毒载量〈4．0 Log的样本，为增加检出概率需要对样本重复检测。DBS样本HIV-1基因诊断方法适合于无条件立即处理血样本的偏远地区或采样困难的感染者的诊断，及HIV-1母婴垂直传播研究中婴幼儿感染的早期诊断。     

危重新生儿的转运和救护

危重新生儿转运是新生儿急救医疗工作的重要组成部分，是提高危重新生儿存活率、降低致残率中极为重要的一环。我院NICU于2002年11月正式启动危重新生儿转运系统（NETS），至2004年11月共转运危重新生儿187例，现将转运及救护体会总结如下。     

农药中毒性肾病的发病机制及临床研究进展

肾损伤是农药中毒后的常见并发症,发病早,持续时间长,轻度农药中毒性肾病通过临床治疗大多可以痊愈,而中、重度农药中毒性肾病往往病死率高,预后差。不同种类的农药所引起的中毒性肾病的发病机制有所不同。通过文献复习,对常见的肾脏损伤机制进行了回顾分析,认为其机制包括:横纹肌溶解致肾小管堵塞,肾小管细胞线粒体损伤导致脂质过氧化应激反应,乙酰胆碱积聚致血管强烈收缩-缺血缺氧和血流动力学改变,毒物蓄积对肾小管细胞的损害,继发性水、电解质、酸碱失衡致间质性肾炎以及全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）。     

在用农药的人体暴露研究进展

在用农药(current used pesticides,CUPs)在防虫、除草、杀菌等方面起到了不可忽视的作用,大幅提高了农作物的产量和农业经济效益。但同时人群也面临广泛暴露于CUPs的风险中。尽管越来越多的研究表明CUPs可能与人群的多种不良健康效应有关,但对CUPs人体暴露研究的系统总结还较为缺乏,各类CUPs人体暴露监测标志物的选择及CUPs标志物的人体负荷也有待归纳比较。该文综述了近年来CUPs(氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、新烟碱类、有机磷杀虫剂,除草剂,杀菌剂)人体暴露(血液,尿液,头发,母乳,胎粪)研究的进展,并对此领域研究的发展前景进行了展望。     

子宫内膜癌中Ki-67、FasL的表达与临床病理特征及预后的关系

目的探讨子宫内膜癌中Ki-67、FasL的表达与临床病理特征及预后的关系,为子宫内膜癌的诊治及预后评估提供理论依据。方法随机选取2013年1月-2015年7月厦门大学附属第一医院收治的96例子宫内膜癌患者病理资料作为研究组,另取非子宫内膜癌患者实施子宫切除患者的病理资料作为对照组,采用实时荧光定量检测Ki-67、FasL mRNA表达水平,采用免疫组化检测Ki-67、FasL蛋白表达水平,分析Ki-67、FasL与子宫内膜癌患者病理参数及预后的相关性。结果研究组患者子宫内膜组织中Ki-67表达水平显著高于对照组患者,差异有统计学意义(P0. 05); Ki-67表达与患者年龄和肌层浸润均无明显相关性(P0. 05),与组织学分级、临床病理分期及淋巴结转移均呈正性相关(P0. 05)。研究组患者子宫内膜组织中FasL表达水平显著高于对照组患者,差异有统计学意义(P 0. 05); FasL表达与患者年龄和肌层浸润均无明显相关性(P0. 05),与组织学分级、临床病理分期及淋巴结转移均呈正性相关(P0. 05)。子宫内膜癌患者2年内生存率与患者年龄、肌层浸润均无明显相关性(P0. 05),与组织学分级、临床病理分期、淋巴结转移及Ki-67和FasL的表达呈正相关性(P0. 05)。组织学分级、临床病理分期、淋巴结转移及Ki-67和FasL的表达是影响子宫内膜癌患者预后的独立因素。结论 Ki-67和FasL在子宫内膜癌的发生发展中发挥重要的作用,临床通过检测Ki-67和FasL表达可有助于为子宫内膜癌的诊治及预后评估提供新的理论依据。     

28例急性有机磷农药中毒的救治体会

目的：总结抢救急性有机磷农药中毒的经验。方法：对我科2010年9月～2014年7月收治的28例急性有机磷农药中毒的患者进行回顾性分析,总结28例患者的院前急救过程及送入医院以后的抢救效果和经验。结果：28例急性有机磷农药中毒患者显效26例（92.8%）,无效死亡2例（7.1%）。结论：急性有机磷农药中毒后及时实施有效的院前急救措施,到医院后进行系统的综合治疗,可明显提高抢救成功率。其中彻底洗胃、合理地应用阿托品和胆碱酯酶复活剂,严密观察病情是抢救成功的关键。     

对长期冷藏保存的双胸蚓溶栓酶活性分析

目的：探讨双胸蚓属蚯蚓体内提取的溶栓酶保存与稳定性。方法采用Folin-酚试剂法,对4℃冷藏保存220个月的溶栓酶制剂的酶活性测定,并观测对人实验性血凝块的溶解作用。结果4℃冷藏保存220个月的溶栓酶制剂的活性为55.1 U/ml;完全溶解(30±5)mg 血凝块的时间为(4.3±0.8)h,与冷藏保存初酶活性测定值和溶解血凝块时间变化在10%左右。结论发现在4℃保存的溶栓酶制剂能持续较长时间,提示该溶栓酶具有较强的稳定性。     

应用气-液界面染毒技术研究柴油机尾气对16HBE细胞的毒性作用

[目的]应用气-液界面染毒技术探索柴油机尾气对人支气管上皮(16HBE)细胞急性毒性作用. [方法]在流速为20 mL/min,37℃的条件下,用柴油机尾气分别对生长在多孔膜上的16HBE细胞持续染毒5、10、15、20、30 min,分别使用CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测法、乳酸脱氢酶(LDH)释放法、中性红摄入法(NRU)检测柴油机尾气对细胞存活率的影响;对细胞存活率约50％以上的染毒组用流式细胞术检测柴油机尾气对细胞凋亡率的影响;同时对每个染毒组分别设置用滤膜过滤的洁净空气作为对照组,暴露时间和检测方法均与染毒组-致. [结果]3种存活率检测方法的结果表明,染毒组与对照组相比,柴油机尾气持续染毒15 min及更长时间以后,细胞存活率降低,差异有统计学意义(P＜ 0.05),且呈随染毒时间延长而逐渐降低的趋势.3种方法比较表明,低流速短时间柴油机尾气对16HBE细胞的损伤作用以细胞膜损伤最为显著,其次是线粒体损伤.用柴油机尾气持续染毒10、15 min,染毒组细胞早期凋亡率、晚期凋亡及坏死率较对照组均升高,差异均有统计学意义(P＜ 0.05).10、15 min染毒组的晚期凋亡及坏死细胞多于早期凋亡细胞(P＜0.05). [结论]气-液界面染毒技术可以应用于柴油机尾气等气溶胶有害物质的体外毒性研究;同时发现柴油机尾气导致的16HBE细胞急性毒性为细胞膜损伤、线粒体损伤及细胞凋亡.